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高難度八聚體錐形孔跨膜蛋白MspA在珀羅汀無細胞平臺成功表達

更新時間:2025-04-03      點擊次數(shù):448

南京航空航天大學(xué)團隊利用自主搭建的珀羅汀無細胞蛋白表達平臺,成功實現(xiàn)了分枝桿菌孔蛋白MspA的高效體外合成,并確認其八聚體錐形孔道結(jié)構(gòu)完整性與天然構(gòu)象高度一致。

突破技術(shù)壁壘,破解跨膜蛋白表達難題

MspA蛋白作為典型的八聚體跨膜通道蛋白,可以為多種氨基酸替代保留高水平表達和通道活性,是通過定點誘變進行工程設(shè)計的理想選擇,其錐形孔道結(jié)構(gòu)在材料和化學(xué)領(lǐng)域具有重要應(yīng)用價值。傳統(tǒng)細胞表達系統(tǒng)因跨膜蛋白的疏水性及多亞基自組裝復(fù)雜性,常面臨表達效率低、構(gòu)象錯誤等問題,而珀羅汀自主研發(fā)的無細胞平臺成功實現(xiàn)MspA八聚體跨膜蛋白的成功表達。

結(jié)構(gòu)精準性獲驗證

該技術(shù)團隊對體外表達的蛋白進行結(jié)構(gòu)解析,結(jié)果顯示,體外表達的MspA蛋白呈現(xiàn)典型的八聚體對稱性,結(jié)構(gòu)域與天然蛋白誤差很小,關(guān)鍵功能位點均與文獻報道一致。

平臺技術(shù)賦能合成生物學(xué)創(chuàng)新

珀羅汀無細胞蛋白表達平臺的突破性進展,不僅為跨膜通道蛋白、離子轉(zhuǎn)運體等"難表達"膜蛋白提供了高效制備方案,更展現(xiàn)出在合成生物元件定制、人工細胞器構(gòu)建等領(lǐng)域的應(yīng)用潛力。

高難度八聚體錐形孔跨膜蛋白MspA在珀羅汀無細胞平臺成功表達

來源南京航空航天大學(xué)團隊





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